PRÁCTICA 1: RECUENTO DE PLAQUETAS POR MÉTODO DIRECTO (10/01/18)

RECUENTO DE PLAQUETAS POR MÉTODO DIRECTO


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- INTRODUCCIÓN

Las plaquetas o trombocitos son fragmentos citoplasmáticos anucleados, desprendidos del borde de los megacariocitos maduros localizados en la médula ósea, muy ricos en organelas y gránulos de secreción.
Las plaquetas circulantes no activadas tienen forma discoidal biconvexa con un diámetro de 2-4 micrometros, un grosor de 0,5-1 micrometros y un volumen de 7-11 fl. Están constituidas por dos componentes estructurales, fundamentales para desarrollar su función: la membrana y el citoplasma.

El recuento de plaquetas es el análisis básico para iniciar un estudio de hemostasia primaria. Este parámetro se incluye en el hemograma obtenido con contadores hematológicos, junto con varios índices plaquetarios, como el plaquetocrito, el volumen plaquetario medio y el índice de dispersión de plaquetas.

- PRINCIPIO DEL MÉTODO

El recuento directo de las plaquetas mediante la cámara de Neubauer, se basa en la mezcla de la sangre con un diluyente que cause la hemólisis de los eritrocitos (oxalato de amonio), para posteriormente introducirla en el hemocitómetro y realizar un recuento de plaquetas con el microscopio óptico.

- SIGNIFICADO CLÍNICO

El recuento normal de plaquetas en sangre periférica oscila entre 150.000 y 400.000 plaquetas/ul.


  • Un recuento inferior a 130.000 plaquetas/ul se considera indicativo de trombocitopenia. 
  • Un recuento superior a 400.000 plaquetas /ul se considera indicativo de trombocitosis.

La trombopenia o trombocitopenia consiste en la disminución del número de plaquetas en sangre por debajo de los valores normales. Puede ser debida a una producción insuficiente de plaquetas en la médula ósea o a un incremento en su destrucción.

La trombocitosis o trombocitemia es una alteración que consiste en el aumento del número de plaquetas en sangre periférica por encima de los valores normales.

Según la etiología, puede ser:


  • Primaria, consecuencia de síndromes mieloproliferativos. La más importante es la trombocitemia esencial.
  • Secundaria o reactiva, en la que las plaquetas aumentan en número como reacción a otros procesos patológicos.







- REACTIVO

Tubo con oxalato amónico al 1%




- MUESTRA

Sangre capilar

- APARATAJE

Microscopio óptico

- MATERIAL

  • Lanceta
  • Placa de Petri
  • Cámara de Neubauer
  • Papel de filtro
  • Agua destilada
  • Micropipeta con sus respectivas puntas
  • Gradilla



 - PROCEDIMIENTO

1. Nos punzamos el dedo con una lanceta e introducimos 20 microlitros de sangre en el tubo con oxalato amónico.

2. Mezclamos suavemente.



3. Añadimos 10 microlitros de la mezcla anteriormente realizada en la cámara de Neubauer.

Podemos observar cómo realizamos dicho paso en el siguiente vídeo:



4. Preparamos una cámara húmeda en una placa de petri con papel de filtro y agua destilada.

5. Introducimos la cámara de recuento en la placa de petri y esperamos durante 10-15 minutos.




6. Visualizamos en el microscopio con el objetivo de 40x  para realizar el recuento de plaquetas.





 - RESULTADOS







  •   Cuadrante 2: 33 plaquetas
  •   Cuadrante 4: 34 plaquetas




- CÁLCULOS


67 plaquetas  ----     0.2 mm3
    x                 ----     1    mm3


x = 335 plaquetas en 1 mm3;

335 plaquetas en 1 mm3 x 1000 = 335.000 plaquetas presentes en sangre.





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