PRÁCTICA 10: CFTH

CAPACIDAD DE FIJACIÓN TOTAL DEL HIERRO 



- FUNDAMENTO

La transferrina sérica se satura con un exceso de Fe 3+ y el exceso no fijado se elimina por precipitación con carbonato magnesico, determinándose a continuación la cantidad total de hierro presente.
La diferencia entre la capacidad de fijación total de hierro hallada y el hierro sérico inicial nos da la capacidad de fijación de hierro no saturado o residual.


- SIGNIFICADO CLÍNICO

El hierro es el constituyente de un gran número de enzimas. La mioglobina, proteína muscular, contiene hierro, así como el hígado. 
El hierro es necesario para la producción de hemoglobina, molécula que transporta el oxígeno en el interior de los glóbulos rojos.
El hierro se controla, normalmente, junto con la capacidad de fijación total del hierro (CFTH), y nos indica la capacidad de unión sérica disponible.
Encontraremos niveles altos de CFTH en la anemia ferropénica.
Niveles bajos en hemocromatosis, cirrosis, hepatitis aguda.


Resultado de imagen de anemia ferropenica  Resultado de imagen de hepatitis aguda



- MATERIAL

  • Pipeta y puntas de pipeta.
  • Cubetas de espectrofotometria.
  • Tubos de ensayo.

- REACTIVOS



  • Reactivo 5 (Solución saturante: solución de hierro)


  • Reactivo 6 (Agente precipitante: magnesio carbonato)
  • Reactivo 3 (Para determinación de Fe sérico)

  • Iron Cal (Para determinación de Fe sérico)

  •  Reactivo de trabajo (Reactivo 1 + Reactivo 2: Para determinación de Fe sérico)

- APARATAJE

  • Espectrofotómetro
  • Centrífuga

- PROCEDIMIENTO

1. Preparamos en los tubos: 500 microlitros de muestra + 1000 microlitros de R5 (solución saturante)




2. Mezclamos bien e incubar 10 min a Tª ambiente (15-25ºC)

 3. Añadimos a cada tubo: 3 dosis de R6 (Agente precipitante)





























4. Mezclamos bien e incubar 10 min a Tª ambiente.

 5. Centrifugamos 15 min a 3000 r.p.m

 6. Recogemos el sobrenadante cuidadosamente y lo procesamos como una muestra para la determinación de hierro.

CFTH = Concentración de hierro en el sobrenadante x 3;

CFTH = 0,010 x 3 = 0,03 


7. Una vez que tenemos el sobrenadante que va a ser nuestra muestra, realizamos la práctica del hierro sérico:






8. A continuación, leemos las absorbancias del Patrón y la muestra frente al Blanco de reactivo

- RESULTADOS

  • Blanco de Reactivo = 0
  • Blanco de Muestra = 0,022
  • Patrón = 0,068

  • Muestra = 0,071


- CÁLCULOS

[0,071 (Muestra) - 0'022 (Blanco muestra) / 0'068 (Patrón)] x 100 = 72,06 µg/dl

- INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS

Valores de referencia:

  • Hombres: 65-175 µg/dl
  • Mujeres: 40-150 µg/dl 
Por tanto, nuestro resultado se encuentra dentro de los valores normales

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