PRÁCTICA 2: APTT. ÁCIDO ELÁGICO (22/01/18)

DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DEL TIEMPO DE TROMBOPLASTINA PARCIAL ACTIVADA

 - FUNDAMENTO

 Los factores intrínsecos de la coagulación se activan en presencia de un complejo fosfolipídico y un activador soluble en plasma citratado; medimos el tiempo transcurrido después de la adición del cloruro cálcico hasta la formación del coágulo de fibrina

 - MATERIAL
  1. Cubetas de coagulación 
  2. Imanes o piezas metálicas
  3. Coagulometro
  4. Pipetas automáticas
  5. Puntas de pipetas
  6. Gradilla

- REACTIVOS

  1. R1 (Ácido elagico)
  2. R2 (Cloruro cálcico)
  3. Control normal
  4. Control patológico

 Resultado de imagen de reactivos APTT





 - APARATAJE
  • Baño termostático
  • Centrífuga
  • Coagulómetro

 - MUESTRA

 Plasma obtenido por centrifugación de una muestra de sangre mezclada con citrato sódico (anticoagulante)


- PROCEDIMIENTO

 1. Centrifugamos la muestra de sangre a 2.500 rpm durante 15 minutos

 2. Transferimos el plasma (100 microlitros)

 3. Incubamos los reactivos y la muestra a 37ºC en el baño termostático durante 5 minutos



4. En la cubeta del coagulómetro añadimos la pieza metálica que actúa como agitador, y ahí mismo pipeteamos 100μL de plasma citratado más 100μL de R1.

     

5. Mezclar bien, por aspiración, e incubar exactamente 5 min a 37ºC (tiempo de activación). Nuestro coagulómetro tiene una placa térmica donde colocamos las muestras y el R2.



6. Ahora, en el coagulómetro, pipeteamos 100μL de R2, inmediatamente se pone en marcha el cronómetro para determinar el tiempo de coagulación de la muestra.


7. Por otro lado, hemos realizado el tiempo de coagulación del control patológico y del control normal pipetando en una cubeta de coagulómetro 100μL de R1 y 100μL de calibrador.

  • Resultados control patológico: 55,8 segundos
  • Resultado control normal: 30, 8 segundos

- RESULTADOS





 - INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
Valores normales:

De 24 a 36 segundos.

Por lo que, según estos valores de referencia mi valor obtenido se encuentro dentro del rango de normalidad, y en consecuencia, no existiría ningún tipo de trastorno de la coagulación intrínseca. 




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