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PRÁCTICA: RECUENTO DE HEMATÍES

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RECUENTO MANUAL DE HEMATÍES - FUNDAMENTO Se basa en la dilución de la sangre total capilar o anticoagulada con EDTA, en  líquido de Hayem , con una pipeta de dilución y recuento de las células mediante hemocitómetro o cámara de recuento utilizando un microscopio óptico. Para calcular el valor total de recuento tendremos en cuenta la dilución utilizada, el área contada y la altura de la cámara utilizada. El  líquido de Hayem  contiene cloruro sódico para que sean isotónicos y evitar hemólisis, e incorpora citrato sódico como anticoagulante y un antiséptico como formalina. - MATERIAL Pipetas de 20 microlitros Cámara de Neubauer Papel de filtro - REACTIVOS Líquido diluyente Hayem   - APARATAJE Microscopio óptico  - MUESTRA Sangre anticoagulada o capilar  - PROCEDIMIENTO 1. Preparar un tubo con  3,98 ml de líquido de Hayem . 2. Pipetear  2 0 microlitros de sangre  en el interior del tubo con líquido de Hayem, pipeteando y absorbi
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PRÁCTICA: RECUENTO DE LEUCOCITOS

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RECUENTO MANUAL DE LEUCOCITOS - FUNDAMENTO La técnica consiste en diluir sangre anticoagulada con EDTA, en  líquido de Turck  y el recuento de las células mediante hemocitómetro o cámara de recuento utilizando un microscopio óptico. Para calcular el valor total de recuento tendremos en cuenta la dilución usada, el área contada y la altura de la cámara utilizada. - MATERIAL Tubos eppendorf Pipetas de 20 microlitros Cámara de Neubauer Papel de filtro - REACTIVOS Líquido de Turck (2mL ácido acético glacial,que rompe los hematíes;  1mL de violeta de genciana, que tiñe el núcleo de los leucocitos al 1% y 100 mL de agua destilada). - MUESTRA Sangre anticoagulada o capilar - APARATAJE Microscopio óptico - PROCEDIMIENTO 1. Preparamos un tubo eppendorf con  0,38 ml de líquido de Turck . 2. Pipeteamos  20 μL de sangre  en el tubo eppendorf, lavando varias, Habremos efectuado una dilución 1/200.   3. Tapamos el tub
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PRÁCTICA 11: ROE

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RESISTENCIA OSMÓTICA ERITROCITARIA - FUNDAMENTO La  resistencia osmótica eritrocitaria  (ROE) o f ragilidad osmótica eritrocitaria  (FOE) es una técnica realizada para el estudio de las membranopatias eritrocitarias. Debido a su forma biconcava, los eritrocitos pueden aceptar, sin producir hemolisis, una entrada de agua capaz de aumentar su volumen hasta el 70%. - SIGNIFICADO CLÍNICO Cuando existe un defecto en la forma del eritrocito que disminuye la relación S/V, como ocurre en la esferocitosis hereditaria, este limite disminuye, y la hemolisis comienza en presencia de soluciones menos hipotonicas, aumentando la ROE. Dicha medida se expresa como aquella concentración de NaCL (en g/L) necesaria para producir el 50% de la hemólisis (H50). - MATERIAL Y REACTIVOS Solución madre de NaCl de 100 g/L en agua bidestilada Soluciones de trabajo Muestra de sangre total anticoagulada Tubos de centrífuga Espectrofotómetro Centrífuga - PROCEDIMIENTO A partir de la
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PRÁCTICA 10: CFTH

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CAPACIDAD DE FIJACIÓN TOTAL DEL HIERRO  - FUNDAMENTO La transferrina sérica se satura con un exceso de Fe 3+ y el exceso no fijado se elimina por precipitación con carbonato magnesico, determinándose a continuación la cantidad total de hierro presente. La diferencia entre la capacidad de fijación total de hierro hallada y el hierro sérico inicial nos da la capacidad de fijación de hierro no saturado o residual. - SIGNIFICADO CLÍNICO El hierro es el constituyente de un gran número de enzimas. La mioglobina, proteína muscular, contiene hierro, así como el hígado.  El hierro es necesario para la producción de hemoglobina, molécula que transporta el oxígeno en el interior de los glóbulos rojos. El hierro se controla, normalmente, junto con la capacidad de fijación total del hierro (CFTH), y nos indica la capacidad de unión sérica disponible. Encontraremos niveles altos de CFTH en la anemia ferropénica. Niveles bajos en hemocromatosis, cirrosis, hepatitis
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PRÁCTICA 9: HIERRO (16/02/18)

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HIERRO - INTRODUCCIÓN El  hierro (Fe)  es un micromineral importante para la vida, aunque se encuentre en muy poca proporción en el cuerpo humano. Es primordial en el transporte de oxígeno, junto con el proceso de respiración celular. Existen dos formas químicas de encontrar el hierro en los alimentos:  hierro hemo  y  hierro no hemo . La absorción de hierro hemo es de, aproximadamente, la cuarta parte y este hierro es el que se encuentra en los alimentos de origen animal. La forma no hemo, presente en los alimentos vegetales, se absorbe en muy baja cantidad (3-8%). Este es el principal motivo por el que el consumo de lentejas para mejorar el contenido en hierro no es especialmente adecuado. - FUNDAMENTO El  hierro  se disocia del complejo sérico hierro-tranferrina en medio ácido débil . El hierro libre se reduce a ión ferroso mediante el ácido débil. El hierro libre se reduce a ión ferroso mediante el ácido ascórbico . Los iones ferrosos en presencia de  FerroZine  fo
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